Como preparar e ativar placas de sílica gel para desempenho ideal

2025-12-18 10:49:11

　　A preparação e ativação adequadas de placas de sílica gel (cromatografia em camada fina ou placas TLC) é uma habilidade fundamental que afeta diretamente a qualidade da sua separação, afetando o formato do ponto, a resolução e a reprodutibilidade de Rf.

　　Parte 1: Compreendendo a “Ativação”

　　Objetivo: Remover a água adsorvida da superfície polar do gel de sílica. A água se liga aos grupos silanol (Si-OH), tornando a superfície menos ativa.

　　Resultado: Uma placa totalmente "ativada" possui uma superfície altamente polar e com adsorção ativa, ideal para cromatografia de fase normal (usando fases móveis não polares como hexano/acetato de etila).

　　Nota importante: Para algumas separações envolvendo compostos muito polares, uma placa totalmente ativada pode causar adsorção excessiva ou formação de resíduos. Nestes casos, a desativação controlada ou o equilíbrio com a umidade do laboratório são realizados após a ativação.

Parte 2: Preparação Passo a Passo e Protocolo de Ativação

　　A. Para placas pré-revestidas (cenário mais comum)

　　Etapa 1: Pré-secagem (condicionamento)

　　Se as placas forem novas da caixa ou tiverem sido armazenadas em ambiente úmido, deixe-as se aclimatar na bancada por 5 a 10 minutos. Isso evita choque térmico e condensação ao colocá-los no forno quente.

　　Etapa 2: pontuação e corte (se necessário)

　　Use um cortador de vidro, uma régua e uma ferramenta de pontuação para cortar a placa no tamanho desejado. Faça isso antes da ativação para evitar danificar a camada frágil e seca.

　　Etapa 3: Ativação do Forno – A Etapa Principal

　　Colocação: Coloque os pratos verticalmente ou inclinados em um forno limpo. Nunca os coloque na horizontal, pois isso pode causar aquecimento irregular e permitir que a condensação volte para a superfície.

　　Temperatura e tempo: 105-110°C por 30 minutos é o padrão. Esta temperatura é alta o suficiente para expulsar a água, mas segura para o aglutinante de gesso (CaSO₄) e o indicador fluorescente (F₂₅₄) na maioria das placas.

　　Para condições extremamente úmidas ou placas expostas por longos períodos, estenda para 45-60 minutos.

　　Qualidade do forno: Use um forno de laboratório limpo e dedicado. Um forno sujo pode depositar contaminantes na superfície da placa.

　　Etapa 4: Resfriamento e armazenamento (crítico!)

　　Transfira imediatamente as placas quentes para um dessecador contendo agente de secagem fresco (por exemplo, sílica gel, cloreto de cálcio, pentóxido de fósforo).

　　Deixe as placas esfriarem até a temperatura ambiente no dessecador (~20-30 minutos). Isso os impede de readsorver a umidade do ar.

　　Armazenamento: Mantenha as placas ativadas no dessecador até o momento em que estiver pronto para localizá-las.

　　Etapa 5: Equilíbrio Controlado Opcional (Para Compostos Polares Problemáticos)

　　Se você estiver separando compostos muito polares (por exemplo, ácidos, aminas, açúcares) e vir resíduos em uma placa totalmente ativada, você pode desativá-los intencionalmente de forma controlada:

　　Ative como acima (etapas 3 e 4).

　　Retire do dessecador e deixe-o repousar na bancada por um tempo fixo (por exemplo, 2, 5 ou 10 minutos) para permitir que se equilibre com a umidade do laboratório.

　　Identifique e execute imediatamente após esse tempo de equilíbrio. Registre o tempo para reprodutibilidade.

　　Parte 3: Casos Especiais e Técnicas Avançadas

　　B. Para pratos preparados internamente (despejando os seus próprios)

　　Preparação da pasta: Misture sílica gel de alta pureza (geralmente com aglutinante) com água ou outro solvente até obter uma pasta homogênea e lisa.

　　Revestimento: Use um revestidor comercial ou uma vareta de vidro simples com extremidades fixas para espalhar a pasta uniformemente sobre uma placa de vidro limpa.

　　Secagem: Seque inicialmente ao ar em uma superfície nivelada até que a camada esteja firme, mas não completamente seca.

　　Ativação Final: Leve ao forno a 110°C por 1-2 horas para secar completamente e ativar a camada. Deixe esfriar e guarde em dessecador.

　　C. Para placas de fase reversa (RP) (por exemplo, C18, C8)

　　NÃO ative em fogo alto. As cadeias de hidrocarbonetos ligadas podem oxidar ou degradar.

　　Procedimento: Secar a 60-80°C durante 15-20 minutos e depois arrefecer num exsicador. A superfície foi projetada para ser menos ativa (cromatografia de partição).

　　Para compostos polares, siga a mesma ativação, mas adicione uma breve etapa de equilíbrio cronometrada. Esta abordagem sistemática garante manchas nítidas e bem resolvidas e cromatografia altamente reprodutível.